![]() |
![]() |
![]() |
Barbour Stockholm Dam,Barbour Delivery SwedenKort peptidaffinitetsmarkörer har blivit oumbärlig i proteinforskning. De kan inte bara användas för affinitetsrening utan även nedströms för detektion och analys av en godtycklig smält rekombinant protein utan behov av någon tidigare kunskap om dess biokemiska egenskaper. Strep-tag®II är särskilt populär för att ge rekombinanta proteiner med hög renhet och funktionalitet med hjälp av fysiologiska förhållanden inom en snabbt ett steg Barbour Delivery Sweden protokoll. Den affinitetsreceptorn för Strep-tag®II är affinitet konstruerad streptavidin, som heter Strep-Tactin®. Strep-tag®II binder till biotin bindningsfickan möjliggör mild konkurrens eluering med biotinderivat, företrädesvis destiobiotin, för upprepad användning av Strep-Tactin® affinitetshartser. Snabba bindande och dissociationskinetik tillåter jämförelsevis höga flöden i hela kolonnkromatografi inklusive eluering. Snabba dissociationskinetik kan dock begränsa för att använda Strep-tag®II för direkt rening av målproteiner från stora volymer av utspädda extrakt som däggdjurs cellodlingssupernatanter eller i analysformat som kräver förlängd tvätt som ELISA. Av denna anledning har bindningsegenskaper förbättras genom utveckling av Twin-Strep-Tag® bestående av två Strep-tag®II molekyldelar förbundna genom en kort linker. Den resulte aviditeten effekten, det vill säga, den kombinerade synergistiska bindningen av två Strep-tag®II grupper att tetramerisk Strep-Tactin® minskar off-rate för mer stabil bindning under icke-konkurrensmässiga villkor. Tillsatsen av en konkurrent, men vänder den synergistiska aviditeten effekten och därmed är effektiv eluering förmåga bevaras. Faktum är att Twin-Strep-Tag® terar alla välgörande egenskaper Strep-tag®II, inklusive effektiv eluering under försiktig konkurrens, men på grund av sin högre affinitet, möjliggör dessutom Barbour Stockholm Dam en mer universell användning i applikationer som kräver en stabil bindning. Copyright © 2013 Elsevier Inc. reserved.KEYWORDS Alla rättigheter: Affinity rening; Aviditet; Cellodling; Rekombinant proteinuttryck; Twin-Strep-Tag® |
||
![]() |
||
©belund |