Barbour Shop Online Sweden,Barbour Online Shop

En 9,5-kb sektion av DNA kallas regionen av deletion 1 (RD1) förekommer i stammar virulenta Mycobacterium tuberculosis, men tas bort i alla försvagade Mycobacterium vaccinstammar bovis BCG. Denna regionskoder för minst nio gener. Några eller alla RD1 genprodukter kan vara inblandade i virulens och patogenes, och åtminstone två, ESAT-6 och CFP-10, representerar potent T- och antigener B-cells. För att producera hela uppsättningen av RD1 proteiner med deras naturliga posttranslationella modifieringar, en robust expressionssystem för M. tuberculosis proteiner i den snabbt växande saprofytiska stammen Mycobacterium smegmatis utvecklades. Vårt system använder den inducerbara acetamidas promotorn och tillåter translationell fusion av rekombinanta tuberkulos proteiner med polyhistidin eller influensa hemagglutinin epitopmärkningar för affinitetsrening M.. Använda EGFP såsom rapportörgen, visade vi att den acetamidas promotorn är hårt reglerad i M. smegmatis och att denna promotor är mycket starkare än den allmänt använda konstitutiva groEL2 promotor. Vi klonade sedan 11 öppna läsramar (ORF) som finns inom RD1 och framgångsrikt uttrycks och renas respektive proteiner. Sera från tuberkulospatienter och möss M. tuberculosis-infected omsattes med 10 renade RD1 proteiner, vilket således visar att Rv3871, Rv3872, Rv3873, CFP-10, ESAT-6, Rv3876, Rv3878, Rv3879c och ORF-14 uttrycks in vivo. Slutligen tillsattes glykosylering av RD1 proteinerna analyseras. Vi presenterar preliminära bevis för att PPE-protein Rv3873 är glykosylerat vid Barbour Shop Online Sweden sin Barbour Online Shop C-terminalen, vilket understryker möjligheten för M. smegmatis producera M. tuberculosis proteiner som bär posttranslationella modifieringar.